一例犬弓首蛔虫和球虫混合感染的病例

引用本文

付媛, 徐丽华, 石团员, 苏菲, 杨富文, 袁秀芳, 舒琦艳, 王德前. 一例犬弓首蛔虫和球虫混合感染的病例[J]. 浙江农业科学, 2017,(1):137-138 复制到剪切板

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一例犬弓首蛔虫和球虫混合感染的病例

付媛, 徐丽华, 石团员, 苏菲, 杨富文, 袁秀芳, 舒琦艳, 王德前^*

浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州 310021

通讯作者:王德前,E-mail:wangdeqian2002@sohu.com。

作者简介:付媛(1980—),女,河北深州市人,助理研究员,硕士,从事兽医寄生虫研究工作,E-mail:lighttwo@126.com。

基金项目:

浙江省农业科学院青年人才培养项目

摘要

对一例幼犬蛔虫和球虫混合感染引发血便的病例进行诊断和治疗。通过实验室测试板检测排除了犬细小病毒、冠状病毒和犬瘟热病毒感染,检查犬粪便初步鉴定为犬蛔虫感染,再对犬蛔虫的成虫和虫卵形态进行观察,鉴定为犬弓首蛔虫,对其进行治疗后,犬只腹泻和血便症状减轻,但未治愈。再用饱和盐水漂浮法检查粪便,发现有大量球虫卵囊,每克粪便卵囊数(EPG)达2.17×10⁴个,卵囊观察确诊为等孢球虫。采用地克珠利和蒙脱石散治疗5 d后,犬只腹泻、血痢症状消失,7 d后显微镜检粪便中无蛔虫虫卵和球虫卵囊。

关键词: 犬弓首蛔虫; 犬等孢球虫; 血便; 混合感染

中图分类号:S858.292;S855.9 文献标志码:A 文章编号:0528-9017(2017)01-0137-02 doi: 10.16178/j.issn.0528-9017.20170144

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幼犬腹泻、血便是犬饲养中经常遇到的问题, 主要的病因有犬细小、冠状和犬瘟热等病毒感染, 也有寄生于肠道的球虫和蛔虫等寄生虫病引起肠道炎症出血, 以及吞食碎骨等硬物引起的肠道物理损伤。病毒感染幼犬一般病程发展迅速, 除了腹泻血便外, 还伴随发热、精神沉郁、呕吐、食欲不振等急性症状, 而寄生虫病和物理损伤引起的血便通常幼犬食欲和体温正常。

寄生于犬肠道的蛔虫包括犬弓首蛔虫(Toxocara canis)和狮弓蛔虫(Toxascaris leiper), 感染犬只一般呈现消瘦、腹泻等症状。犬的球虫病是由艾美耳科等孢属(Isospora)球虫寄生于犬的小肠和大肠黏膜上皮细胞内, 引起出血性肠炎^[1]。本文将对临床中一例幼犬蛔虫和球虫混合感染引起血便的病例诊治进行报道。

1 病例简介

2 月龄柯基公犬, 体重2 kg, 主诉拉稀、粪便带血多日, 饮食正常。经检查发现鼻镜湿润, 体温38.5 ℃, 呼吸25次· min^-1, 心率110次· min^-1, 精神状态正常, 体态偏瘦。

2 诊断与治疗

2.1 蛔虫病的诊断和治疗

2.1.1 粪便显微镜诊断和治疗

用市售韩国BIT公司测试板检测粪便中犬细小病毒和冠状病毒, 结果为阴性, 检测口拭子中的犬瘟热病毒, 结果为阴性。采集病犬新鲜粪便少量, 用PBS溶解混匀直接镜检, 于200倍显微镜下观察发现大量直径大于70 μ m类球形虫卵, 虫卵壳厚, 表面有许多蜂窝状凹陷, 有蛔虫卵特征, 如图1所示。初步判定为蛔虫感染。用拜耳公司的拜宠清按照剂量口服1/4片驱虫。

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	图1 犬粪便中犬弓首蛔虫虫卵显微镜不同放大倍数的观察

2.1.2 虫体形态观察

使用驱虫药物24 h内, 先后从粪便中排泄出8条成虫, 其中3条雄虫, 体长6~8 cm, 尾部弯曲成钩状, 5条雌虫, 与雄虫相比粗壮, 体长10~12 cm, 尾端直(图2中A)。通过解剖显微镜观察发现, 虫体头部呈现3片唇, 有向后延伸的颈翼膜(图2中B), 根据形态判断其为犬弓首蛔虫。用药1周后, 粪便再次显微镜检, 没有发现蛔虫虫卵。

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	图2 犬弓首蛔虫成虫形态观察\|\|\| A为雌虫和雄虫; B为虫体头部放大, 箭头所示为唇

2.2 球虫显微镜诊断

该犬用药治疗蛔虫3 d后, 腹泻状况有改善, 但仍然有拉稀和带血粪便出现, 用饱和盐水漂浮法检查粪便, 具体操作步骤如下:2 g粪便, 加饱和食盐水50 mL, 混匀, 筛滤, 取滤液倒入青霉素瓶中, 滴管补加粪液, 滴至液面凸出管口, 覆以清洁盖玻片, 并使液体和盖玻片接触, 其间不留气泡, 直立0.5 h后, 将盖玻片放于载玻片上镜检。检查发现大量球虫卵囊, 椭圆形, 大小约为40 μ m× 30 μ m, 壁光滑, 部分孢子化卵囊中可见两个孢子囊, 如图3所示。根据卵囊大小和孢子囊可知该球虫为等孢球虫属(Isospora), 具体种类未鉴定。用麦克马斯特氏法(McMaster’ s method)计数, 结果每克粪便球虫卵囊数(EPG)为2.17× 10⁴ 个。采用地克珠利 0.15 mg· kg^-1· d^-1拌料饲喂, 配合蒙脱石散, 早晚分开服用, 同时犬舍保持干净, 粪便及时清理。用药5 d后粪便成型无血便, 7 d后犬粪便饱和盐水漂浮法检查发现仅有个别破碎球虫卵。

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	图3 犬等孢球虫卵囊显微镜不同放大倍数观察

3 讨论

幼犬拉稀腹泻为犬养殖中常见疾病, 影响犬只生长发育, 严重者幼犬死亡。感染犬的蛔虫种类有两种:犬弓首蛔虫和狮弓蛔虫。犬弓首蛔虫成虫和虫卵形态较狮弓蛔虫(雄虫体长35~40 mm, 雌虫体长为44~70 mm)大, 本病例中通过形态大小可以判定为犬弓首蛔虫^[2]。幼犬有舔舐其他犬粪便、吞食草等异嗜的习惯, 导致蛔虫感染性虫卵的吞食, 肠内孵出幼虫经移行重返肠道发育成成虫, 成犬感染弓首蛔虫后, 幼虫移行随血流到达身体各个器官组织中, 形成包囊不发育, 母犬怀孕后, 幼虫可以经胎盘屏障或母乳传播给幼犬^[1]。同时该病也是重要的人畜共患病, 幼虫在体内移行对机体产生机械性损伤, 引起内脏幼虫移行症, 在眼睛处可引起眼睛幼虫移行症, 严重影响人类健康^[2]。本病例中, 幼犬体内大量成虫寄生, 严重刺激肠道引起卡他性肠炎和黏膜出血, 经驱虫药物治疗后, 血便状况有改善。

感染犬球虫粪便初次检查并没有发现球虫虫卵, 可能原因为蛔虫治疗后肠道损伤严重, 继发球虫感染, 但不能排除粪便直接显微镜检查疏漏, 球虫虫卵较小, 容易忽略, 用饱和盐水漂浮法可以克服。

对于确诊为寄生虫感染的病犬不需要过度治疗, 使用相应的驱虫药物和针对腹泻采用蒙脱石散等吸附剂可以有效减轻症状^[3], 出血症状严重的可以给予酚磺乙胺(止血敏)注射治疗。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献:

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[1]	孔繁瑶. 家畜寄生虫学 [M]. 2版. 北京: 中国农业大学出版社, 1997: 147, 346. [本文引用:2]
[2]	盛中华. 五种野生动物蛔虫核糖体及线粒体DNA多态性的研究 [D]. 长春: 吉林农业大学, 2012: 4-5. [本文引用:2]
[3]	杜山, 吴树清, 卢爱桃. 蒙脱石散辅助治疗不同病因引起犬的腹泻疗效[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2010(8): 105-106. [本文引用:1]

1997

0.0

... 犬的球虫病是由艾美耳科等孢属(Isospora)球虫寄生于犬的小肠和大肠黏膜上皮细胞内,引起出血性肠炎^[1] ...

... 幼犬有舔舐其他犬粪便、吞食草等异嗜的习惯,导致蛔虫感染性虫卵的吞食,肠内孵出幼虫经移行重返肠道发育成成虫,成犬感染弓首蛔虫后,幼虫移行随血流到达身体各个器官组织中,形成包囊不发育,母犬怀孕后,幼虫可以经胎盘屏障或母乳传播给幼犬^[1] ...

2012

0.0

盛中华. 五种野生动物蛔虫核糖体及线粒体DNA多态性的研究 [D]. 长春: 吉林农业大学, 2012: 4-5.

蛔虫(Ascaris)隶属于线形动物门、线虫纲(Nematoda)、尾感器亚纲(Phasmidia)、蛔目(Ascaridida)、蛔科(Ascaridae)、弓首科(Toxocaridae)、禽蛔科(Ascaridiidae)以及异尖科(Anisakidae),是寄生于多种脊椎动物小肠内的大型线虫,其中很多种类还可感染人。动物和人感染后,呈现发育缓慢,营养不良,消瘦,贫血及腹痛、腹泻等症状,幼虫的移行还会造成宿主脏器的机械性损伤,在非特异宿主体内还会引起幼虫移行症(larva migrans,LM),严重者造成宿主死亡。蛔虫病呈世界性分布,对人和动物的危害十分严重。以往对蛔虫的研究主要集中在形态描述、生活史及蛔虫病的流行病学调查、诊断和综合防治措施等传统寄生虫学研究方面,利用核糖体序列和线粒体基因对野生动物蛔虫进行分子分类和种系发生的研究还少见报道。采集自然感染斑马(Equus burchelli)、亚洲黑熊(Ursus thibetanus)、非洲狮(Panthera leo)、狼(Canis lupus)和野猪(Sus scrofa)药物驱除虫体,进行形态学鉴定。利用SDS-蛋白酶K方法抽提上述五种野生动物蛔虫的基因组DNA,并依据GenBank上已上传的各蛔虫的基因序列,应用软件Oligo6.0设计5对PCR所用的特异性引物,扩增蛔虫核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer regions,ITS)序列、28S核糖体DNA大亚基(28S ribosomal DNA large-subunit sequences,28S rDNA-LSU)序列、线粒体色素c氧化酶亚基1(cytochrome c oxidase subunit1gene, cox1)基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基1(nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit1gene, nad1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基4(nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit4gene, nad4),扩增产物经纯化后克隆于pMD18-T载体,分别转化到DH5感受态细胞中,抽提质粒DNA,经双酶切鉴定后,阳性质粒测序。在GenBank上查找蛔虫相关基因序列,应用DNAStar软件比较这5种野生动物体内寄生蛔虫和GenBank上蛔虫相关基因序列的同源性,确定蛔虫的种类。通过对核糖体ITS序列的分析,利用RFLP方法,选用限制性EcoRV和Sal1内切酶对所扩增的寄生于狼和狮的蛔虫核糖体核苷酸序列进行酶切,建立两种相似线虫分子鉴定方法。然后应用Clustal X1.83分子生物学软件对上述的序列进行完全对比并排序,提交引导树,再后使用MEGA4.0, PAUP4.0、Modeltest3.7和MrBayes3.1软件采用最大似然法(Maximum Likelihood methods, ML)、最大简约法(Maximum Parsimony methods, MP)和贝叶斯法(Bayesian)绘制系统发生树。结果显示,斑马、亚洲黑熊、非洲狮、狼和野猪5种野生动物体内蛔虫ITS-1+ITS-2序列长度分别为657bp、703bp、698bp、808bp和752bp,与马副蛔虫、转移贝蛔虫、狮弓蛔虫、犬弓首蛔虫和猪蛔虫的相似度分别为98.3%,98.7%,96.1%,99.8%和99.9%。序列分析结果表明,这5种蛔虫分别为马副蛔虫、转移贝蛔虫、狮弓蛔虫、犬弓首蛔虫和猪蛔虫。PCR-RFLP的鉴别结果与形态学鉴定结果一致,成功的鉴别了犬首蛔虫和狮弓蛔虫。基于核糖体ITS序列,线粒体cox1、nadl和nad4基因,采取ML、MP和Bayesian三种方法构建的系统发生树结果一致,马副蛔虫、转移贝蛔虫、狮弓蛔虫以及猪蛔虫之间的亲缘关系较近,犬弓首蛔虫与其他四种蛔虫的亲缘关系较远。本研究应用分子生物学手段鉴定了来源于动物园的5种野生动物蛔虫,结果与形态学方法一致。应用PCR-RFLP方法比较相似的狮弓蛔虫和犬弓首蛔虫进行鉴定,建立的方法不但准确高效而且节省了财力。应用核糖体序列ITS和线粒体序列coxl、nadl和nad4等分子标记,采用ML、MP和Bayesian三种方法对这5种蛔虫进行系统的进化分析,准确地定位了这些蛔虫的进化和分类地位。为进一步的野生动物蛔虫的研究和防治奠定了基础。

... 犬弓首蛔虫成虫和虫卵形态较狮弓蛔虫(雄虫体长35~40 mm,雌虫体长为44~70 mm)大,本病例中通过形态大小可以判定为犬弓首蛔虫^[2] ...

... 同时该病也是重要的人畜共患病,幼虫在体内移行对机体产生机械性损伤,引起内脏幼虫移行症,在眼睛处可引起眼睛幼虫移行症,严重影响人类健康^[2] ...

2010

0.0

... 对于确诊为寄生虫感染的病犬不需要过度治疗,使用相应的驱虫药物和针对腹泻采用蒙脱石散等吸附剂可以有效减轻症状^[3],出血症状严重的可以给予酚磺乙胺(止血敏)注射治疗 ...