湖羊羊痘疫苗免疫抗体消长规律分析
吴婷1, 刘跃生2, 徐雅萍1, 邱寒峰3, 俞乾挺3, 翟汉平3, 严羽1
1.桐乡市动物疫病预防控制中心,浙江 桐乡 314500
2.嘉兴职业技术学院,浙江 嘉兴 314036
3.桐乡市畜牧兽医局,浙江 桐乡 314500

作者简介:吴 婷(1981—),女,浙江嘉兴人,助理兽医师,本科,从事动物疫病预防控制技术工作, E-mail:405697210@qq.com

摘要

采用间接ELISA方法开展湖羊羊痘疫苗免疫效果监测,研究羊痘疫苗免疫后其抗体的消长规律。结果表明:湖羊在羊痘疫苗免疫后的第7、14、28、61、210 天,羊痘病毒抗体水平合格率分别达到94.3%、97.1%、99.1%、85.7%、79.1%。羊痘疫苗注射后30 d内抗体阳性率整体呈平稳上升趋势, 30~60 d缓慢下降,但依然保持较高水平;60~210 d 抗体阳性率平稳持续下降,但抗体水平合格率仍保持在70%以上,达到国家规定的免疫合格标准。本研究为湖羊场制定合理的羊痘免疫程序提供了实验依据。

关键词: 桐乡湖羊; 羊痘; 免疫; 抗体消长规律
中图分类号:S851.3 文献标志码:A 文章编号:0528-9017(2017)04-0709-02 doi: 10.16178/j.issn.0528-9017.20170449

羊痘是一种急性、热性、接触性传染病, 是由羊痘病毒感染所致, 主要特征是在病羊皮肤和粘膜上形成特殊的痘疹。羊痘不仅具有很高的发病率和死亡率, 常引起孕羊流产, 而且致使多数病羊丧失生产力, 对养羊业造成严重的经济损失[1]。羊痘传播速度快, 可发生于全年任何季节, 但以春秋两季多发, 主要在冬末春初流行, 常呈地方性流行或大流行[2]。羊痘属于我国一类动物疫病, 一旦发病应采取严格控制扑灭措施, 疫病的预防应采取加强饲养管理和疫苗免疫为主的综合性防控措施, 尽量避免该病的发生[3]。桐乡是湖羊养殖大市, 2015年全年养殖量约21.25万只。因此, 切实做好湖羊羊痘防控工作, 对于本地区湖羊养殖业持续健康发展具有重要意义。

1 材料与方法
1.1 材料

1.1.1 试验动物

在桐乡市某规模湖羊养殖场选取170~200日龄、体重30~35 kg, 未经羊痘疫苗免疫且无临床疾病症状的健康湖羊作为试验动物。

1.1.2 疫苗来源

羊痘疫苗为辽宁益康生物股份有限公司生产的山羊痘活疫苗, 批号:201601, 免疫有效期为12个月。

1.1.3 试剂

羊痘间接ELISA抗体检测试剂盒, 批号:20160412119, 购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.1.4 仪器

Eppendorf单、双道可调移液器; 中科PHW-165Q恒温培养箱; 美国伯乐MODEL680酶标仪。

1.2 方法

1.2.1 试验地点

桐乡市某规模湖羊养殖场, 总存栏量为1 200 只, 在3栋、5栋随机选取未经羊痘疫苗免疫且在相同环境下饲养的105 只健康湖羊。

1.2.2 免疫方法

山羊痘活疫苗按说明书要求, 用生理盐水稀释为每头份0.5 mL; 采用尾根内侧皮内注射的方法, 免疫剂量为0.5 mL· 只-1。注射时应当注意消毒, 严格遵守操作规范。

1.2.3 临床观察及血样采集

在注射山羊痘活疫苗前后各1 周内, 观察实验羊的临床症状, 如体温、呼吸、采食、精神等方面均无不良反应。分别在免疫后的第7天、第14天、第28天、第61天、第210天经颈静脉采血, 分离血清。其中, 3栋采样70 份, 5栋采样35 份。

1.2.4 实验室检测

采用间接ELISA检测羊痘病毒抗体, 按试剂盒使用说明书操作。判定标准:D450≥ 0.25, 抗体阳性; D450≤ 0.2, 抗体阴性; 0.25> D450> 0.20, 判为阳性可疑, 重复检测一次, 若D450≥ 0.23判定为阳性, D450< 0.23则判为阴性。

2 结果与分析

湖羊羊痘疫苗免疫后抗体检测结果见表1。试验湖羊在羊痘疫苗注射后第7天已经产生较高水平的抗体, 抗体合格率达到94.3%; 第14天、第28天抗体水平合格率分别为97.1%和99.1%, 说明抗体水平整体呈平稳向上态势, 并在第28天左右达到峰值; 第61天抗体水平合格率为85.7%, 抗体水平有所下降; 第210天抗体水平合格率为79.1%, 抗体效价水平明显下降, 但总体维持在国家规定的免疫合格率70%标准以上。

表1 免疫后不同时间羊痘抗体水平的变化

表1中还可以看出, 在免疫后第7天均产生了较高水平的抗体, 在免疫后第14至28天抗体阳性率平稳上升, 且在第28天左右达到最高水平。在第30至60天抗体阳性率略有下降, 但依然保持较高的水平。第61~10天, 抗体阳性率继续平稳下降, 但抗体水平合格率仍保持在70%以上。

3 讨论

通过对湖羊免疫羊痘疫苗后不同阶段抗体水平及消长规律的实验研究, 为改进桐乡地区以往羊痘免疫工作中存在的不足, 提供了科学依据。

羊痘是严重危害养羊业生产的重大动物传染病[4]。在湖羊饲养过程中, 定期接种疫苗, 建立合理的免疫程序至关重要。根据农业部动物疫病免疫监测要求, 加强对羊群羊痘的普查、抗体水平的监测, 及时分析疫苗免疫后抗体的消长规律, 明确免疫间隔时间。一般安排在春季或秋季集中免疫, 避免过度免疫或免疫不足, 造成不必要的损失, 以达到较好的免疫效果。

本试验在桐乡市某规模湖羊养殖场, 通过持续抽样监测湖羊群免疫羊痘弱毒活疫苗后血清抗体的消长动态, 表明羊痘疫苗抗体消长呈现规律性, 免疫后第7天左右产生抗体, 第14天左右逐步上升, 到第28天左右达到高峰水平, 群体免疫合格率可保持到210 d, 这与该疫苗在山羊群的免疫抗体消长规律基本一致[5, 6]

羊痘疫苗的免疫应严格遵守疫苗接种操作要求, 如羊痘疫苗一般选择在羊只股内侧、尾根内侧下方进行注射, 每只皮下注射0.5 mL。大多数情况下, 羊只接种后4~5天就能够产生主动免疫力[1]

通过对湖羊羊痘疫苗免疫后抗体消长规律的研究, 为浙江省有效预防和控制羊痘的发生, 制定合理的湖羊羊痘免疫程序提供了科学的实验依据。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献:
[1] 吴丽娟. 羊痘病的病因、症状和防控措施[J]. 现代畜牧科技, 2016(10): 143. [本文引用:2]
[2] 康文玉, 徐自忠, 高洪, . 羊痘的研究进展[J]. 畜牧兽医杂志, 2005, 24(3): 18-20. [本文引用:1]
[3] 吴永忠, 胡南. 山羊痘的诊治[J]. 中国动物保健, 2016(10): 63-64. [本文引用:1]
[4] 颜新敏, 吴国华, 李健, . 羊痘在中国的流行现状分析[J]. 中国农学通报, 2010, 26(24): 6-9. [本文引用:1]
[5] 刘忠伟, 周碧君, 虞天德. 山羊痘免疫效果检测[J]. 贵州农业科学, 2007, 35(5): 82-84. [本文引用:1]
[6] 赵利平, 魏学峰, 高换河, . 山羊痘灭活疫苗免疫持续期试验[J]. 中国兽药杂志, 2007, 41(3): 18-20. [本文引用:1]