本次调查主要对浙江省12个葡萄主产区生产基地和贮运环节的100批次葡萄样品进行检测。涉及的产区有萧山区、余姚市、长兴县、南湖区、海盐县、上虞区、金东区、浦江县、衢江区、天台县、仙居县、三门县。

2.2.1 仪器

Nexera X2超高效液相色谱(日本岛津公司); TripleQuad 4500串联四极杆质谱(美国ABSCIEX公司); KQ-5200E型超声波清洗器(昆山市超声仪器公司); Primo R低温冷冻离心机(美国Thermo公司); 甲醇(色谱纯, 美国Merck公司); 水(娃哈哈纯净水)。

2.2.2 仪器条件

液相条件。色谱柱:Inertsil ODS-3, 2 μ m(75 mm× 2.10 mm)。流动相:甲醇, 5 mmol· L^-1甲酸铵水溶液(V: V)10: 90。流速为0.25 mL· min^-1, 柱温30 ℃, 进样时间7 min, 进样体积为5 μ L。

质谱条件:扫描方式, MRM; 离子源, ESI(-); 气帘气, 40 psi; 离子化电压, -4 500 V; 温度, 450 ℃; 喷雾气, 30 psi; 辅助加热气, 30 psi。质谱离子条件见表2, 回收率和相对标准偏差见表3。

表2

表2

表2 质谱离子条件 母离子 子离子 DP CE 142.7 107(定量) -40 -17 142.7 79.3(定性) -40 -25

表2 质谱离子条件

表3

表3

表3 乙烯利在葡萄样品中的回收率及相对标准偏差 添加浓度/(mg· L-1) 回收率/% 相对标准偏差/% 0.03 86.7 3.14 0.30 82.3 0.27 3.00 84.4 1.77

表3 乙烯利在葡萄样品中的回收率及相对标准偏差

2.2.3 试验方法

称取10.00 g样品至50 mL离心管中, 加水20 mL, 超声提取15 min, 在5 000 r· min^-1的转速条件下离心3 min, 然后取上清液过0.22 μ m有机滤膜, 滤液供液相色谱-串联质谱测定。

根据调查和检测结果, 在浙江省12个主要葡萄产区的100份葡萄样品的残留检测中, 乙烯利检出(含量≥ 0.01 mg· kg^-1)4份, 总检出率为4%, 检出范围为0.08~1.56 mg· kg^-1。在4份具有乙烯利检出的葡萄样品中有1份样品的乙烯利检测含量超标(含量≥ 1 mg· kg^-1), 超标的原因可能是抽样时间离施药时间过于接近, 或者是施药浓度过高, 另外涂抹时因液滴造成局部污染的可能性也较大。从检出率和超标率数据来看, 浙江省葡萄中乙烯利的使用量和使用浓度整体较低, 绝大部分样品未有乙烯利检出。

目前国际上对葡萄中乙烯利的最大残留限量(MRL)没有统一规定, 但是近年来各国均提出了较为严格的限量要求, 例如美国对乙烯利在葡萄上的MRL为2 mg· kg^-1, 澳大利亚为10 mg· kg^-1, 欧盟为0.7 mg· kg^-1, 日本和CAC均为1 mg· kg^-1。在我国, 乙烯利暂未在葡萄上登记, 若参照美国的MRL, 则本试验取样测定的100份样品中无含量超过2 mg· kg^-1的样品, 即合格率为100%, 若参照日本和CAC的MRL, 则只有1份样品中超过了1 mg· kg^-1, 合格率为99%。

按照国际上普遍认可的风险评估原理和方法, 每日摄入量(EDI)用式(1)估计。式中:EDI— 每日摄入量的估计值, 单位μ g· kg^-1· d^-1; C— 慢性风险评估中表示葡萄中乙烯利的平均残留值, 急性风险评估中表示葡萄中乙烯利的P97.5位点值, 单位mg· kg^-1; F— 葡萄的消费量, 单位g· d^-1; bw— 体重, 单位kg。

EDI=CF/bw。(1)

慢性摄入风险按式(2)计算。式中, ADI为每日允许摄入量, 单位为mg· kg^-1。当%ADI≤ 100%时, 表示慢性风险可接受, %ADI越小, 慢性风险越小; 当%ADI> 100%时, 表示有不可接受的慢性风险, %ADI越大, 慢性风险越大。

%ADI=100× EDI/ADI。(2)

急性摄入风险按式(3)计算。式中:ARfD— 每日允许摄入量的急性参考剂量, 单位为mg· kg^-1。当%ARfD≤ 100%时, 表示急性风险可接受, %ARfD越小, 急性风险越小; 当%ARfD> 100%时, 表示有不可接受的急性风险, %ARfD越大, 急性风险越大。

%ARfD=100× EDI/ARfD。(3)

FAO/WHO农药残留联合专家委员会(JMPR)确定乙烯利每日允许摄入量(ADI)为0.05 mg· kg^-1· d^-1, 急性参考剂量(ARfD)为0.05 mg· kg^-1· d^-1。葡萄消费数据参照我国成年人水果消费量, 依据2007年卫生部中国居民营养与健康状况调查数据, 我国成年人日均水果消费量为0.151 kg, 葡萄大份餐数据按1.312 kg计算(参照法国大份餐数据)。根据以上数据和本次检测得到的乙烯利残留量, 我们计算出浙江省葡萄中乙烯利的慢性膳食风险(%ADI)为0.13%, 低于1%; 急性膳食风险(%ARfD)为5.74%, 低于10%。FAO/WHO农药残留联合专家委员会(JMPR)对乙烯利的毒理评估资料显示乙烯利对哺乳动物毒性较低, 而本次检测的100份样品中乙烯利的残留量较低, 慢性风险和急性风险都较低, 所以浙江省葡萄中乙烯利的残留对人们的膳食风险在可接受范围内。另外值得注意的是, 葡萄中乙烯利急性风险的计算基于极端假设, 即消费人群大量食用了高乙烯利残留的葡萄, 在现实生活中发生该种情况的概率极低。

我国目前关于乙烯利在葡萄中并无登记, 说明在应用技术、环境、安全评估等方面还不成熟, 有待进一步研究。鉴于乙烯利在葡萄生产中的必不可少, 为充分发挥乙烯利在葡萄中的作用, 政府与科研单位应深入研究葡萄中乙烯利应用的技术与环境安全等问题, 制定合理使用准则, 健全配套的安全使用技术, 包括施药时期、剂量、方法、使用范围、安全间隔期和注意事项等, 同时鼓励厂家开展乙烯利在葡萄上的登记, 完善登记手续, 促进乙烯利在葡萄上应用的合法化和规范化。

在促进乙烯利在葡萄上登记的基础上, 还要进一步加强乙烯利产品市场的监督与管理, 对于未达标准的产品拒绝其登记上市, 坚决打击伪劣产品, 让监管者、生产者和消费者都处于健康的市场环境中。在葡萄的实际生产过程中, 监管和技术部门要充分发挥其技术优势, 树立农民对于乙烯利的正确观念, 指导农民科学用药, 从源头上控制和杜绝乙烯利的滥用现象。

目前公众对于乙烯利在葡萄上的应用存在误区, 所以在消费引导上, 建议科研与推广部门加强科普宣传, 同时应最大化利用新媒体等形式客观介绍乙烯利在葡萄生产中所起到的作用和对人畜环境所起到的影响等, 减少公众对以乙烯利为代表的催熟剂的排斥心里, 消除不必要的恐慌。

调研发现, 葡萄生产中叶面肥使用现象普遍, 甚至使用无标注标签的配方产品。结合本实验室开展的投入品隐形成分筛查, 发现在5个叶面肥样品检测中, 均存在植物生长调节剂。本次评估中乙烯利超标的样品, 可能因为使用了标称催红转色的叶面肥而导致的残留。由于标称是肥料, 农户对其安全性并不关注, 认为此类肥料非常安全, 无需考虑间隔期。为进一步避免叶面肥不规范使用导致问题隐患, 需要加强叶面肥监管, 开展叶面肥中农药隐性成分筛查, 尤其是植物生长调节剂的筛查, 严防叶面肥和其他投入品中的隐形添加而导致葡萄中乙烯利含量超标。