浙江农业科学

›› 2008, Vol. 1 ›› Issue (05): 0-620.

• 论文 •    

大肠杆菌LTb蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

刘焕；王一成；袁秀芳；徐丽华   

  1. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江,杭州,320021;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江,杭州,320021;新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-11

Preparation and identification of the monoclonal antibodies of Escherichia coli LTb protein

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-11

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摘要： 将大肠杆菌不耐热肠毒素LTb基因去除信号肽后与载体pPIC9K连接,电转化入酵母菌SMD 1168中进行诱导表达.用纯化的LTb表达蛋白免疫8周龄BALB/c鼠3次后,取脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞进行融合后,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗大肠杆菌LTb单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该株单克隆抗体命名为1F2,2C2,3D6,4H6株.经Western blotting分析,这4株均能与大肠杆菌LTb表达蛋白产生特异性反应.抗体亚型鉴定表明,1F2, 2C2,3D6,4H6株均为IgG2a型.成功获得单克隆抗体为今后LTb蛋白的深入研究以及抗原表位分析提供有益价值.

关键词: 大肠杆菌LTb, 单克隆抗体