棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D的原核表达及活性检测

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20190755

浙江农业科学 ›› 2019, Vol. 60 ›› Issue (7): 1250-1255.DOI: 10.16178/j.issn.0528-9017.20190755

棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D的原核表达及活性检测

程福珍¹, 洪燕¹, 郑荣泉^1,2,*, 梅祎芸¹, 王志刚¹, 张丹丹¹, 李贤露¹

1.浙江师范大学野生动物保护与利用技术中心野生动物生物技术与保护利用浙江省重点实验室,浙江金华 321004;
2.浙江师范大学行知学院,浙江金华 321004

收稿日期:2019-05-18 出版日期:2019-07-11
通讯作者: 郑荣泉,E-mail: zhengrq@zjnu.cn。
作者简介:程福珍(1994—),女,山西朔州人,硕士研究生,主要从事养殖学研究工作,E-mail:1635132571@qq.com。
基金资助:
国家自然科学基金(31772482,31472015); 浙江省自然科学基金重点项目(LZ17C030001); 浙江省省院合作林业科技项目(2016SY12); 金华市科技计划项目(2013-2-1008)

Received:2019-05-18 Online:2019-07-11

摘要/Abstract

摘要： 抗菌肽是一类具有多种生理活性,具备新型抗菌机制的多肽,是替代传统抗生素,成为新一代治疗药物的理想选择。本研究人工合成棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D成熟区基因片段,双酶切原核表达载体pET-32a(+)后回收线性化载体,In-Fusion克隆技术构建重组质粒后转化至E.Coli DH5α感受态细胞,筛选阳性单菌落进行菌液PCR鉴定和测序,转化pET-32a(+)-Spinosan-D至BMBL21(DE3)pLysS菌株。通过优化诱导表达的时间、温度和异丙基株-β-D-硫代吡喃半半乳糖苷(IPTG)终浓度,实现棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D融合蛋白的最优化表达,并检测其活性。本研究旨在为规模化制备Spinosan-D和进一步开发利用提供基础。

中图分类号:

程福珍, 洪燕, 郑荣泉, 梅祎芸, 王志刚, 张丹丹, 李贤露. 棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D的原核表达及活性检测[J]. 浙江农业科学, 2019, 60(7): 1250-1255.

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