蛙源寡养单胞菌的分离鉴定及其生物学特性

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20213005

摘要/Abstract

摘要：

为探明浙江省某规模化黑斑蛙养殖场患病黑斑蛙的致病原,本研究利用传统病原菌分离方法,从濒死黑斑蛙的脑、肝脏、肺、眼、腹水中均分离到同一种细菌,编号为Y-13,进一步对其形态特征、理化特征、分子特征、致病性、耐药性和适用灭菌剂等进行研究。16S rRNA基因序列分析显示菌株Y-13属于寡养单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)。毒力回归试验表明菌株Y-13对黑斑蛙具有较高的致病性,从人工感染黑斑蛙的脑脊液、眼、肠道中重新分离到菌株Y-13,其半致死浓度(LD₅₀)为7.3×10⁶ mL^-1。药敏试验结果显示菌株Y-13对β-内酰胺类、大环内脂类、硝基呋喃类和多肽类抗生素均有耐药性。次氯酸和超氧水等灭菌剂对菌株Y-13抑制作用较为明显,其最低抑菌浓度(MIC)均为12.5 mg·L^-1。本研究首次报道了我国蛙源寡养单胞菌的分离鉴定及生物学特性,以期为黑斑蛙病害的防控提供科学依据。

关键词: 黑斑蛙, 寡养单胞菌属, 分离鉴定, 致病性, 耐药性, 灭菌剂

中图分类号:

S947.2

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图/表 7

参考文献 13

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特征	Y-13	S. terrae strain DSM 18941	S. humi strain DSM 18929	S. nitritireducens strain DSM 12575
溶血性	+	nd	nd	nd
40 ℃生长	+	-	-	-
3% NaCl生长	+	+	+	nd
D-葡萄糖同化	+	+	-	-
吐温80水解	-	+	-	+
硝酸盐还原酶	-	+	+	-
明胶水解	-	+	W	-

特征	Y-13	S. terrae strain DSM 18941	S. humi strain DSM 18929	S. nitritireducens strain DSM 12575
溶血性	+	nd	nd	nd
40 ℃生长	+	-	-	-
3% NaCl生长	+	+	+	nd
D-葡萄糖同化	+	+	-	-
吐温80水解	-	+	-	+
硝酸盐还原酶	-	+	+	-
明胶水解	-	+	W	-

组别	菌液浓度/mL^-1	死亡数	死亡率/%
1	5×10⁸	30	100.0
2	5×10⁷	20	66.7
3	5×10⁶	11	36.7
4	5×10⁵	6	20.0
5	5×10⁴	3	10.0
CK	0	0	0

组别	菌液浓度/mL^-1	死亡数	死亡率/%
1	5×10⁸	30	100.0
2	5×10⁷	20	66.7
3	5×10⁶	11	36.7
4	5×10⁵	6	20.0
5	5×10⁴	3	10.0
CK	0	0	0

抗菌素	抑菌圈直径/mm	敏感度	抗菌素	抑菌圈直径/mm	敏感度
氨苄西林	0	R	阿米卡星	30	S
阿莫西林	24	S	妥布霉素	42	S
苯唑西林	0	R	链霉素	15	S
美洛西林	42	S	大观霉素	18	S
头孢噻吩	0	R	卡那霉素	0	R
头孢唑啉	0	R	依诺沙星	0	R
头孢氨苄	0	R	诺氟沙星	0	R
头孢拉定	0	R	环丙沙星	25	S
头孢西汀	0	R	恩诺沙星	39	S
头孢克洛	0	R	氟苯尼考	0	R
头孢他啶	0	R	氯霉素	15	I
亚胺培南	30	S	呋喃妥因	0	R
克林霉素	0	R	呋喃唑酮	0	R
红霉素	16	I	多黏菌素B	0	R
罗红霉素	0	R	万古霉素	0	R
阿奇霉素	9	R	杆菌肽	0	R
乙酰螺旋霉素	24	S	磺胺异恶唑	0	R
吉他霉素	0	R	复方磺胺甲噁唑	24	S
利福平	15	R	四环素	0	R

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灭菌剂	实验浓度/(mg·L^-1)	活菌数/mL^-1
高锰酸钾	2 000	0
	1 000	0
	500	0
	250	0
	125	1.6×10³
	62.5	4.0×10³
硫酸铜	2 000	0
	1 000	0
	500	1.0×10³
	250	3.0×10³
聚维酮碘	1 000	0
	500	0
	250	0
	125	1.2×10³
	62.5	3.0×10³
次氯酸	100	0
	50	0
	25	0
	12.5	0
	6.25	5.0×10²
	3.13	4.0×10³
超氧水	100	0
	50	0
	25	0
	12.5	0
	6.25	5.0×10²
	3.13	4.0×10³

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