柑橘中农药多残留检测方法比对分析

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20212886

摘要/Abstract

摘要：

本研究比较胶体金免疫层析法与超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测柑橘中嘧菌酯、啶虫脒、吡虫啉、丙溴磷、多菌灵5种高风险农药的残留。结果显示,1)在UPLC-MS/MS下,嘧菌酯、吡虫啉、啶虫脒和丙溴磷的检出限均为0.000 5 mg·L^-1,多菌灵为0.001 mg·L^-1;多菌灵定量限为0.1 mg·kg^-1,其余4种农药定量限均为0.01 mg·kg^-1。在胶体金法下,嘧菌酯、啶虫脒、吡虫啉、丙溴磷、多菌灵的检出限分别为0.2、0.5、0.3、0.2、0.3 mg·L^-1。2)UPLC-MS/MS回收率试验中,嘧菌酯、啶虫脒、吡虫啉、丙溴磷农药在柑橘中的添加水平均为0.010~1.0 mg·kg^-1时,嘧菌酯平均回收率为78%~91%,相对标准差均小于7.0%;啶虫脒平均回收率为97%~103%,相对标准差均小于1.2%;吡虫啉平均回收率为88%~95%,相对标准差均小于1.3%;丙溴磷平均回收率为73%~78%,相对标准差小于3.1%;多菌灵在柑橘中的添加水平为0.10~1.0 mg·kg^-1时,多菌灵平均回收率为87%~95%,相对标准差均小于5.0%。3)免疫层析法精密度良好;假阳性率均为0%,假阴性率为0~10%,与UPLC-MS/MS的检测结果一致。

关键词: 胶体金, 柑橘, 嘧菌酯, 多菌灵, 啶虫脒, 吡虫啉, 丙溴磷

中图分类号:

S481

贾惠言, 吴银良. 柑橘中农药多残留检测方法比对分析[J]. 浙江农业科学, 2022, 63(6): 1345-1350.

图/表 7

参考文献 22

[1]	熊亚波, 闫晓俊, 颜静, 等. 新型柑橘贮藏保鲜剂的研究进展[J]. 食品科学, 2015, 36(9):284-288.
[2]	CHHIKARA N, KOUR R, JAGLAN S, et al. Citrus medica:nutritional,phytochemical composition and health benefits-a review[J]. Food & Function, 2018, 9(4):1978-1992.
[3]	ZHA J, WU X, GONG G L, et al. Pathway enzyme engineering for flavonoid production in recombinant microbes[J]. Metabolic Engineering Communications, 2019, 9:e00104. DOI URL
[4]	国家统计局农村社会经济调查司. 中国农村统计年鉴[M]. 北京: 中国统计出版社, 2020.
[5]	DONG M F, WEN G Y, TANG H X, et al. Dissipation and safety evaluation of novaluron,pyriproxyfen,thiacloprid and tolfenpyrad residues in the Citrus-field ecosystem[J]. Food Chemistry, 2018, 269:136-141. DOI URL
[6]	BESIL N, PÉREZ-PARADA A, BOLOGNA F, et al. Dissipation of selected insecticides and fungicides applied during pre-harvest on mandarin and orange trees in Uruguay[J]. Scientia Horticulturae, 2019, 248:34-40. DOI URL
[7]	ZHAO J L, TAN Z C, WEN Y, et al. Dissipation of fluazinam in Citrus groves and a risk assessment for its dietary intake[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2020, 100(5):2052-2056.
[8]	LI Z X, ZHANG Y H, ZHAO Q Y, et al. Occurrence,temporal variation,quality and safety assessment of pesticide residues on Citrus fruits in China[J]. Chemosphere, 2020, 258:127381. DOI URL
[9]	林涛, 陈兴连, 刘兴勇, 等. QuEChERS-三重四极杆串联质谱测定柑橘中农药基质效应的方法研究[J]. 果树学报, 2021, 38(4):613-622.
[10]	史晓亚, 高丽霞, 黄登宇. 快速检测技术在果蔬安全控制中的研究进展[J]. 食品安全质量检测学报, 2017, 8(3):882-889.
[11]	张圆圆, 刘磊, 李娜, 等. 农药残留检测中不同蔬菜的基质效应[J]. 农药学学报, 2019, 21(3):327-337.
[12]	蒲继锋, 潘虎, 代艳娜, 等. 气相色谱法测定茄果类蔬菜中12种有机磷类农药残留[J]. 食品安全质量检测学报, 2020, 11(4):1192-1196.
[13]	NO H Y, KIM Y A, LEE Y T, et al. Cholinesterase-based dipstick assay for the detection of organophosphate and carbamate pesticides[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 594(1):37-43. DOI URL
[14]	SALAM F, PUAT N H A, RAHMAN G A, et al. Comparative study of pesticides analysis using enzyme inhibition sensor and gas chromatography methods[J]. Procedia Chemistry, 2016, 20:33-39. DOI URL
[15]	于基成, 边辞, 赵娜, 等. 酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷农药残留[J]. 江苏农业科学, 2006(5):170-172.
[16]	中华人民共和国国家卫生健康委员会, 中华人民共和国农业农村部, 国家市场监督管理总局. 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量:GB 2763—2019[S], 北京: 中国农业出版社, 2019.
[17]	王林, 王晶, 张莹, 等. 蔬菜中有机磷和氨基甲酸醋类农药残留量的快速检测方法研究[J]. 中国食品卫生杂志, 2003, 15(1):39-41.
[18]	刘雅宁, 袁宝凤. 农药残留胶体金检测方法在蔬菜生产中的应用研究[J]. 陕西农业科学, 2014, 60(3):67-68.
[19]	FRENS G. Preparation gold dispersions of varying particle size:controlled nucleation for the regulation of the particle size inmonodisperse gold solutions[J]. Nature Physical Science, 1973, 241(105):20-22. DOI URL
[20]	GEOGHEGAN W D. The effect of three variables on adsorption of rabbit IgG to colloidal gold[J]. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry, 1988, 36(4):401-407. DOI URL
[21]	FOUBERT A, BELOGLAZOVA N V, DE SAEGER S. Comparative study of colloidal gold and quantum dots as labels for multiplex screening tests for multi-mycotoxin detection[J]. Analytica Chimica Acta, 2017, 955:48-57. DOI URL
[22]	ZHANG Y, PENG J, GUO P, et al. Matrix effect of swine urine on time-resolved fluorescent nanobeads and colloidal gold immunochromatographic assay[J]. Food and Agricultural Immunology, 2018, 29(1):711-721. DOI URL

农药	最适pH		最适抗体浓度/ (μg·mL^-1)		实际抗体用量/μg
农药	目测法	分光光度法	目测法	分光光度法	实际抗体用量/μg
嘧菌酯	7.5	8.5	50.0	50.0	6.0
啶虫脒	7.5	7.5	31.2	31.2	3.8
吡虫啉	7.5	7.5	62.5	48.8	5.8
丙溴磷	7.0	8.5	50.0	50.0	6.0
多菌灵	8.5	8.5	50.0	100.0	12.0

农药	最适pH		最适抗体浓度/ (μg·mL^-1)		实际抗体用量/μg
农药	目测法	分光光度法	目测法	分光光度法	实际抗体用量/μg
嘧菌酯	7.5	8.5	50.0	50.0	6.0
啶虫脒	7.5	7.5	31.2	31.2	3.8
吡虫啉	7.5	7.5	62.5	48.8	5.8
丙溴磷	7.0	8.5	50.0	50.0	6.0
多菌灵	8.5	8.5	50.0	100.0	12.0

农药名称	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)		抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)		抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)
农药名称	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50
嘧菌酯	0.60	0.50	1∶5	-	+	0.30	1.00	1∶5	-	±	0.30	0.50	1∶2	-	±
	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶4	-	+
	0.15	0.50	1∶5	±	+	0.30	0.25	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶8	-	+
啶虫脒	0.40	0.50	1∶5	-	+	0.20	0.80	1∶5	-	±	0.20	0.40	1∶2	-	±
	0.20	0.50	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶5	-	+
	0.10	0.50	1∶5	±	+	0.20	0.20	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶10	-	+
吡虫啉	0.60	1.00	1∶2	-	+	0.60	2.00	1∶2	-	±	0.60	1.00	1∶1	-	±
	0.30	1.00	1∶2	±	+	0.60	1.00	1∶2	-	+	0.60	1.00	1∶2	-	+
	0.15	1.00	1∶2	±	+	0.60	0.50	1∶2	-	+	0.60	1.00	1∶5	-	+
丙溴磷	1.00	0.50	1∶5	-	+	0.50	1.00	1∶5	-	±	0.50	0.50	1∶2	-	±
	0.50	0.50	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶4	-	+
	0.25	0.50	1∶5	±	+	0.50	0.25	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶8	-	+
多菌灵	0.60	0.50	1∶5	-	+	0.30	1.00	1∶5	-	±	0.30	0.50	1∶2	-	±
	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶4	-	+
	0.15	0.50	1∶5	±	+	0.30	0.25	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶8	-	+

农药名称	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)		抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)		抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	标样浓度/ (μg·mL^-1)
农药名称	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50	抗原浓度/ (mg·mL^-1)	二抗浓度/ (mg·mL^-1)	金标抗体稀释比例	0	0.50
嘧菌酯	0.60	0.50	1∶5	-	+	0.30	1.00	1∶5	-	±	0.30	0.50	1∶2	-	±
	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶4	-	+
	0.15	0.50	1∶5	±	+	0.30	0.25	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶8	-	+
啶虫脒	0.40	0.50	1∶5	-	+	0.20	0.80	1∶5	-	±	0.20	0.40	1∶2	-	±
	0.20	0.50	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶5	-	+
	0.10	0.50	1∶5	±	+	0.20	0.20	1∶5	-	+	0.20	0.40	1∶10	-	+
吡虫啉	0.60	1.00	1∶2	-	+	0.60	2.00	1∶2	-	±	0.60	1.00	1∶1	-	±
	0.30	1.00	1∶2	±	+	0.60	1.00	1∶2	-	+	0.60	1.00	1∶2	-	+
	0.15	1.00	1∶2	±	+	0.60	0.50	1∶2	-	+	0.60	1.00	1∶5	-	+
丙溴磷	1.00	0.50	1∶5	-	+	0.50	1.00	1∶5	-	±	0.50	0.50	1∶2	-	±
	0.50	0.50	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶4	-	+
	0.25	0.50	1∶5	±	+	0.50	0.25	1∶5	-	+	0.50	0.50	1∶8	-	+
多菌灵	0.60	0.50	1∶5	-	+	0.30	1.00	1∶5	-	±	0.30	0.50	1∶2	-	±
	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶4	-	+
	0.15	0.50	1∶5	±	+	0.30	0.25	1∶5	-	+	0.30	0.50	1∶8	-	+

农药	线性范围/ (mg·L^-1)	线性方程	相关系数
嘧菌酯	0.000 5~0.050	y=7 250 168 x+11 127	0.998 6
啶虫脒		y=16 772 539 x-4 818	0.999 9
吡虫啉		y=163 327 496 x-29 066	0.999 9
丙溴磷		y=47 263 162 x-31 346	0.999 4
多菌灵	0.001~0.50	y=344 394 x+1 567	0.999 7