浙江农业科学

›› 2013, Vol. 1 ›› Issue (9): 0-1201.

• 论文 •    

对虾桃拉综合征病毒环介导逆转录等温扩增快速检测方法的建立

徐海圣1，王美珍2，戎华南2   

  1. 1浙江大学 动物科学学院，浙江 杭州310058； 2慈溪市水产技术推广中心,浙江 慈溪315300
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2013-09-11 发布日期:2013-09-11

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2013-09-11 Published:2013-09-11

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摘要： 根据对虾桃拉综合征病毒（TSV）结构蛋白基因保守序列，利用Primer Explorer 40软件设计了4条引物，建立桃拉综合征病毒环介导逆转录等温扩增快速（RTLAMP）检测方法，对反应温度和反应时间等参数进行了优化；同时将建立的RTLAMP检测方法与RTPCR进行比较分析，RTLAMP的检测灵敏度比RTPCR高10倍。结果表明，RTLAMP最适反应在60 ℃恒温条件60 min内完成，凝胶电泳呈现梯型条带；反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后，绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果；RTLAMP对感染TSV的对虾检测呈阳性，而对对虾其他常见病原检测均为阴性，具有高的特异性。

关键词: 桃拉综合症病毒, 南美白对虾, 环介导逆转录等温扩增, 快速检测