浙江农业科学 ›› 2019, Vol. 60 ›› Issue (1): 55-57.DOI: 10.16178/j.issn.0528-9017.20190118

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槜李叶片DNA提取方法探讨

李白1, 李军2, 王蕾1, 种高军1,*   

  1. 1.嘉兴市农业科学研究院,浙江 嘉兴 314016;
    2.嘉兴职业技术学院 农业与环境分院,浙江 嘉兴 314036
  • 收稿日期:2018-11-20 出版日期:2019-01-11
  • 通讯作者: 种高军(1978—),男,陕西渭南人,林业工程师,本科,从事植物组织培养研究工作,E-mail:gaojunchong@126.com
  • 作者简介:李白(1986—),男,浙江温州人,农艺师,硕士,从事农业分子育种及微生物学研究工作,E-mail:libaia@yeah.net。
  • 基金资助:
    嘉兴市科技计划项目(2017AY13030); 嘉兴职业技术学院教学改革项目(JG20802)

  • Received:2018-11-20 Online:2019-01-11

摘要: 槜李是蔷薇科(Rosaceae)李属(Prunus L.)植物中栽培中国李(Prunus salicina Lindl.)的一个品种群,果品珍贵,经济价值较高。槜李叶片富含多糖,常规技术提取的DNA纯度较差、电泳杂带较多。本研究分别用CTAB、SDS、高盐和硅胶膜法提取槜李叶片DNA,通过DNA浓度、纯度、电泳条带和可操作性评价4种方法。结果表明,CTAB法提取的DNA条带完整,有杂带,残留一定RNA和多糖杂质,除蛋白过程需氯仿抽提,操作繁琐;SDS法电泳条带与CTAB法相似,多糖残留较CTAB法多,操作较CTAB法简易;高盐法浓度最高,操作简易,但杂质多;硅胶膜法操作简易,但DNA浓度低,残留多糖杂质。用CTAB纯化法纯化CTAB、SDS和高盐法提取的基因组DNA,减少了多糖杂质和电泳杂带。将SDS法结合CTAB纯化法提取槜李基因组DNA,过程无需氯仿抽提,成本低廉,且获得DNA质量较好,适合批量提取槜李样品,并满足下游各种分子实验的开展。

关键词: 槜李, DNA提取, CTAB, 纯化

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