水产品中硝基呋喃类药物代谢残留的不确定度评定

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20220688

摘要/Abstract

摘要：

本研究参照农业部783号公告-1-2006《水产品中硝基呋喃类药物代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》检测方法,对硝基呋喃类药物残留量进行测定。通过建立数学模型,对测量结果中产生的各个不确定度来源进行分析,分别对A类和B类不确定度进行评定,从而提高检测结果的准确性。4种硝基呋喃类代谢物的相对合成标准不确定度范围为 5.47%~10.60%。通过探讨该方法不确定度的来源及主要因素,确保检验结果的可靠性,对实际操作中减少不确定度,为正确评价和使用检测数据提供依据。

关键词: 超高效液相色谱-串联质谱法, 硝基呋喃类代谢物, 不确定度, 水产品

中图分类号:

S948

吕燕. 水产品中硝基呋喃类药物代谢残留的不确定度评定[J]. 浙江农业科学, 2022, 63(9): 2098-2102.

图/表 11

表1 液相色谱梯度洗脱条件

时间/ min	体积分数/%
时间/ min	φ(A)5 mmol·L^-1乙酸铵	φ(B)甲醇
0.0	90	10
6.5	50	50
6.6	10	90
7.0	90	10

表2 目标化合物液质测定条件

目标化合物	母离子 (m/z)	子离子 (m/z)	去簇电压/V	碰撞能量/V	保留时间/min
AOZ	236	104/134	28	22/14	5.63
AOZ-D4	240	134	28	14	5.60
AMOZ	335	262/291	26	16/11	4.16
AMOZ-D5	340	296	26	11	4.07
SEM	209	134/192	25	10/13	5.77
SEM-N	212	168	25	11	5.75
AHD	249	104/134	28	22/13	5.52
AHD-N	252	134	28	13	5.52

图1 不确定度来源的因果关系

表3 硝基呋喃类代谢物回归方程测量结果

待测物	质量浓度/ (μg·mL^-1)	峰面积比值			线性回归方程	r
待测物	质量浓度/ (μg·mL^-1)	1	2	3	线性回归方程	r
AOZ	1.00	0.066	0.059	0.069	Y=0.083 7X-0.033	0.999 7
	5.00	0.405	0.395	0.401
	10.00	0.837	0.832	0.841
	50.00	4.000	3.995	4.124
	100.00	8.328	8.338	8.511
AMOZ	1.00	0.058	0.064	0.065	Y=0.088 5X-0.044 2	0.999 6
	5.00	0.399	0.437	0.435
	10.00	0.851	0.827	0.909
	50.00	4.413	4.169	4.200
	100.00	8.957	8.824	8.821
SEM	1.00	0.175	0.252	0.216	Y=0.086 2X+0.120 1	0.999 2
	5.00	0.510	0.563	0.528
	10.00	1.127	1.093	1.030
	50.00	4.278	4.231	4.289
	100.00	9.079	8.523	8.840
AHD	1.00	0.048	0.052	0.061	Y=0.067 9X-0.004 3	1.000 0
	5.00	0.335	0.365	0.360
	10.00	0.662	0.672	0.708
	50.00	3.249	3.541	3.308
	100.00	6.651	6.879	6.866

表4 相对不确定度

目标化合物	质量浓度/ (μg·mL^-1)	平均质量浓度/ (μg·mL^-1)	残差的标准差 (S)	不确定度 (u)	相对标准不确定度 u_rel(c₀)
AOZ	12.5	33.2	0.075 5	0.589 2	0.046 94
AMOZ	10.3		0.138 5	0.967 2	0.093 59
SEM	10.8		0.119 8	0.860 3	0.079 38
AHD	10.6		0.020 4	0.185 6	0.017 50

表5 标准物质纯度引入的相对标准不确定度

目标化合物	纯度/%	不确定度/%	k	u_rel
AOZ	99.32	1.73	$3$	0.001 17
AMOZ	99.69	3.73		0.001 73
SEM	99.80	0.92		0.002 92
AHD	99.38	2.99		0.000 58

表5 标准物质纯度引入的相对标准不确定度

目标化合物	纯度/%	不确定度/%	k	u_rel
AOZ	99.32	1.73	$3$	0.001 17
AMOZ	99.69	3.73		0.001 73
SEM	99.80	0.92		0.002 92
AHD	99.38	2.99		0.000 58

表6 标准曲线配制引入的不确定度

使用量具	移取或定容体积/mL	最大容量允差/mL	定容溶剂	体积膨胀系数/ (mL·℃^-1)	实验室温差/℃	u_{(体积误差)}	u_(溶剂标)	使用次数	u_{(合成不确定度)}	u_(标配)
10 mL单标线容量瓶	10.0	0.040	水	0.000 208	5	0.023 095	0.006 005	5	0.002 386	0.020 86
100 mL单标线容量瓶	100.0	0.200	甲醇	0.001 180		0.115 473	0.340 647	2	0.003 597
1 000 μL移液枪	1.0	0.010	水	0.000 208		0.005 774	0.000 600	6	0.005 805
1 000 μL移液枪	1.0	0.010	甲醇	0.001 180		0.005 774	0.003 406	1	0.006 704
100 μL移液枪	0.1	0.002	水	0.000 208		0.001 155	0.000 060	1	0.011 563

表7 样品制备过程引入的不确定度

使用量具	移取或定容体积/mL	最大容量允差/mL	定容溶剂	体积膨胀系数/ (mL·℃^-1)	实验室温差/℃	u_{(体积误差)}	u_(溶剂样)	使用次数	u_{(合成不确定度)}	u_(样配)
5 mL移液管	5.0	0.050	水	0.000 208 0	5	0.028 9	0.003 002	1	0.005 8	0.031 9
10 mL移液管	10.0	0.040	乙酸乙酯	0.001 392 7		0.023 1	0.040 205	2	0.004 6
1 000 μL移液枪	1.0	0.010	水	0.000 208 0		0.005 8	0.000 600	1	0.005 8
100 μL移液枪	0.1	0.003	水	0.000 208 0		0.001 7	0.000 060	2	0.017 3
100 μL移液枪	0.1	0.003	二甲亚砜	0.000 882 3		0.001 7	0.000 255	1	0.017 5

表8 重复测定结果及其相对标准不确定度(n=6)

目标化合物	测定值/(μg·kg^-1)						$X ¯$	s( $X ¯$ )	$u f r e p$	u_rel(f_rep)
目标化合物	1	2	3	4	5	6	$X ¯$	s( $X ¯$ )	$u f r e p$	u_rel(f_rep)
AOZ	0.898	0.877	0.864	0.874	0.878	0.876	0.878	0.011 3	0.004 6	0.005 24
AMOZ	1.071	1.106	1.038	1.051	1.091	1.053	1.069	0.026 0	0.010 6	0.009 92
SEM	1.003	0.990	0.993	0.960	1.052	1.036	1.006	0.033 2	0.013 5	0.013 46
AHD	0.739	0.731	0.684	0.746	0.716	0.710	0.721	0.022 6	0.009 2	0.012 78

表8 重复测定结果及其相对标准不确定度(n=6)

目标化合物	测定值/(μg·kg^-1)						$X ¯$	s( $X ¯$ )	$u f r e p$	u_rel(f_rep)
目标化合物	1	2	3	4	5	6	$X ¯$	s( $X ¯$ )	$u f r e p$	u_rel(f_rep)
AOZ	0.898	0.877	0.864	0.874	0.878	0.876	0.878	0.011 3	0.004 6	0.005 24
AMOZ	1.071	1.106	1.038	1.051	1.091	1.053	1.069	0.026 0	0.010 6	0.009 92
SEM	1.003	0.990	0.993	0.960	1.052	1.036	1.006	0.033 2	0.013 5	0.013 46
AHD	0.739	0.731	0.684	0.746	0.716	0.710	0.721	0.022 6	0.009 2	0.012 78

表9 加标回收率结果和加标实验引入的相对标准不确定度

目标化合物	回收率/%						$R ¯$	S	u_rel(R)
目标化合物	1	2	3	4	5	6	$R ¯$	S	u_rel(R)
AOZ	118.0	115.0	114.0	114.0	120.0	116.0	116.16	0.980 3	0.008 44
AMOZ	87.8	86.2	86.3	88.0	83.5	83.5	85.88	0.812 1	0.009 46
SEM	103.0	92.5	106.0	101.0	101.0	113.0	102.75	2.750 0	0.026 76
AHD	89.0	100.0	92.9	90.1	93.7	94.3	93.33	1.580 0	0.016 93

表9 加标回收率结果和加标实验引入的相对标准不确定度

目标化合物	回收率/%						$R ¯$	S	u_rel(R)
目标化合物	1	2	3	4	5	6	$R ¯$	S	u_rel(R)
AOZ	118.0	115.0	114.0	114.0	120.0	116.0	116.16	0.980 3	0.008 44
AMOZ	87.8	86.2	86.3	88.0	83.5	83.5	85.88	0.812 1	0.009 46
SEM	103.0	92.5	106.0	101.0	101.0	113.0	102.75	2.750 0	0.026 76
AHD	89.0	100.0	92.9	90.1	93.7	94.3	93.33	1.580 0	0.016 93

表10 合成相对标准不确定度和不确定度

目标化合物	各不确定度分量						u_rel(c)	u_c(X)
目标化合物	u_rel(c₀)	u_rel(c_s)	u_rel(m)	u_rel(V)	u_rel(f_rep)	u_rel(R)	u_rel(c)	u_c(X)
AOZ	0.046 9	0.031 5	0.014 3	0.031 9	0.005 2	0.008 4	0.067 2	0.075 0
AMOZ	0.093 6	0.032 8	0.014 3	0.031 9	0.009 9	0.009 5	0.106 0	0.091 1
SEM	0.079 4	0.032 1	0.014 3	0.031 9	0.013 5	0.026 8	0.097 2	0.099 9
AHD	0.017 5	0.031 9	0.014 3	0.031 9	0.012 8	0.016 9	0.054 7	0.051 1

参考文献 15

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