绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20220350

浙江农业科学 ›› 2023, Vol. 64 ›› Issue (1): 87-91.DOI: 10.16178/j.issn.0528-9017.20220350

绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

胡亚群¹^,²(), 周琰琰¹^,², 薛冬², 韦雅雯¹^,², 闫强², 袁星星², 陈新¹^,²^,^*()

1.南京农业大学生命科学学院,江苏南京 210095
2.江苏省农业科学院经济作物研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,江苏南京 210014

收稿日期:2022-08-14 出版日期:2023-01-11 发布日期:2023-01-11
通讯作者: 陈新
作者简介:陈新(1970—)男,江苏射阳人,研究员,博士,从事豆类作物遗传育种研究工作,E-mail:cx@jaas.ac.cn。
胡亚群(1996—),女,山东滨州人,硕士,从事豆类作物遗传育种研究工作,E-mail:2020116005@stu.njau.edu.cn。
基金资助:
国家重点研发计划杂粮抗逆绿色增效关键栽培技术研发(2020YFD1000801);江苏省特粮特经产业技术体系集成创新中心〔2021〕423;江苏省种业振兴揭榜挂帅项目(JBGS〔2021〕004)

Received:2022-08-14 Online:2023-01-11 Published:2023-01-11

摘要/Abstract

摘要：

组织培养的关键是对外植体灭菌,目前效果最佳的灭菌剂氯化汞属于剧毒试剂,对环境及人体均有危害。为探究更加安全有效的灭菌方式,本研究以绿豆为试验材料,以75%乙醇+30%次氯酸钠联合灭菌、4%过碳酸钠、氯气3种灭菌处理方式搭配灭菌时间共8组处理,统计其萌发及污染情况,并在7 d时统计长势相关数据。另外,每组在接种3 d时制备外植体转接至分化培养基,观察统计污染及丛生芽状况,根据数据分析结果选出最优灭菌剂及灭菌时间。结果表明,75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min处理下其污染率为4%,丛生芽分化率为82%,生长速率与生长状况良好。因此,该方法最适合于绿豆组织培养的种子灭菌,有利于愈伤组织的诱导。

关键词: 绿豆, 灭菌, 萌发, 污染, 组培

中图分类号:

S522

胡亚群, 周琰琰, 薛冬, 韦雅雯, 闫强, 袁星星, 陈新. 绿豆种子组织培养的几种灭菌方法[J]. 浙江农业科学, 2023, 64(1): 87-91.

图/表 10

参考文献 17

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处理	处理方法
T1	75%乙醇30 s+30%次氯酸钠15 min
T2	75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min
T3	75%乙醇1 min+30%次氯酸钠15 min
T4	75%乙醇1 min+30%次氯酸钠30 min
T5	4%过碳酸钠溶液15 min
T6	4%过碳酸钠溶液30 min
T7	氯气3 h
T8	氯气6 h

处理	处理方法
T1	75%乙醇30 s+30%次氯酸钠15 min
T2	75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min
T3	75%乙醇1 min+30%次氯酸钠15 min
T4	75%乙醇1 min+30%次氯酸钠30 min
T5	4%过碳酸钠溶液15 min
T6	4%过碳酸钠溶液30 min
T7	氯气3 h
T8	氯气6 h

处理	3 d	4 d	5 d	6 d	7 d
T1	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T2	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T3	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T4	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T5	23 a	30 a	43 a	67 a	83 a
T6	13 ab	37 a	37 a	67 a	67 a
T7	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T8	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b

处理	3 d	4 d	5 d	6 d	7 d
T1	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T2	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T3	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T4	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T5	23 a	30 a	43 a	67 a	83 a
T6	13 ab	37 a	37 a	67 a	67 a
T7	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b
T8	0 b	0 b	0 b	0 b	0 b

处理	1 d	2 d	3 d	4 d	5 d	6 d	7 d
T1	17 a	77 bc	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T2	7 bc	87 ab	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T3	10 ab	87 ab	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T4	3 bc	70 c	97 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T5	10 ab	93 a	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T6	7 bc	80 abc	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T7	3 bc	87 ab	93 a	93 b	93 b	93 b	93 b
T8	0 c	90 ab	93 a	93 b	93 b	93 b	93 b

绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

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组别	主根长/cm	茎长/cm	生物量/g
T1	6.21 b	6.17 a	0.37 a
T2	6.40 ab	6.31 a	0.37 a
T3	6.00 b	6.40 a	0.33 a
T4	6.66 ab	6.53 a	0.36 a
T5	7.19 a	5.81 b	0.36 a
T6	6.42 ab	4.77 b	0.34 a
T7	6.62 ab	6.19 a	0.38 a
T8	6.60 ab	6.21 a	0.36 a

组别	3 d	5 d	7 d	9 d	11 d	13 d	15 d	17 d	19 d
T1	0 b	0 b	0 b	0 c	4 c	11 c	13 c	13 c	20 bc
T2	0 b	0 b	0 b	0 c	0 c	2 c	4 c	4 c	4 c
T3	0 b	4 b	4 b	4 c	4 c	4 c	4 c	7 c	7 c
T4	0 b	0 b	2 b	2 c	7 c	18 c	18 c	31 b	33 b
T5	0 b	0 b	0 b	60 b	60 b	64 b	71 b	84 a	87 a
T6	49 a	98 a	98 a	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a	100 a
T7	0 b	0 b	13 b	13 c	87 a	91 a	91 ab	91 a	93 a
T8	0 b	0 b	0 b	4 c	13 c	18 c	18 c	36 b	38 b

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