高效液相色谱法测定果蔬中维生素C的方法改进与验证

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20260181

摘要/Abstract

摘要：

针对果蔬基质中维生素C易氧化变质、色谱测定干扰多的技术难点，本研究对现有高效液相色谱（HPLC）法的还原步骤与色谱条件进行优化。结果表明，还原处理前L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸含量及还原处理后L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸含量的检出限分别低至0.14、0.13、0.35和0.32 mg·kg^-1，两种异构体在测定范围内线性良好，决定系数（R²）≥0.999 9，在低、中、高3水平加标回收实验中（n=7），回收率为90.0%～106.0%，相对标准偏差≤2.5%。改进后的方法操作简便、基质干扰少，能够同时满足维生素C氧化前后的含量测定，适用于果蔬样品的批量检测与推广。

关键词: 高效液相色谱法, 维生素C, 果蔬, 检出限, 回收率

Abstract:

To address the issues of oxidative degradation of vitamin C and severe chromatographic interference in fruit and vegetable matrices，this study optimized the reduction procedure and chromatographic conditions of the existing high-performance liquid chromatography（HPLC）method. The results showed that limits of detection for L-ascorbic acid and D-isoascorbic acid before reduction，and for L-ascorbic acid and D-isoascorbic acid after reduction，were as low as 0.14，0.13，0.35，and 0.32 mg·kg^-1，respectively. Both isomers exhibited good linearity within the respective concentration ranges，with coefficient of determination（R2）of no less than 0.999 9. In the three-level（low，medium，and high）spiked recovery experiments（n=7），the recovery rates ranged from 90.0% to 106.0%，with relative standard deviations of no more than 2.5%. The improved method is simple in operation with less matrix interference，and can simultaneously determine the content of vitamin C before and after oxidation，making it suitable for batch detection and routine application for fruit and vegetable samples.

Key words: high-performance liquid chromatography, vitamin C, fruits and vegetables, limit of detection, recovery rate

中图分类号:

O657.7+2

陈国. 高效液相色谱法测定果蔬中维生素C的方法改进与验证[J]. 浙江农业科学, 2026, 67(9): 2270-2274.

CHEN Guo. Improvement and validation of an HPLC method for the determination of vitamin C in fruits and vegetables[J]. Journal of Zhejiang Agricultural Sciences, 2026, 67(9): 2270-2274.

图/表 8

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时间/min	流速/（mL·min^-1）	A相体积分数/%	B相体积分数/%
0	0.8	99.0	1.0
3.60	0.8	92.0	8.0
4.00	0.8	65.0	35.0
10.00	0.8	65.0	35.0
12.00	0.8	99.0	1.0
17.00	0.8	99.0	1.0

时间/min	流速/（mL·min^-1）	A相体积分数/%	B相体积分数/%
0	0.8	99.0	1.0
3.60	0.8	92.0	8.0
4.00	0.8	65.0	35.0
10.00	0.8	65.0	35.0
12.00	0.8	99.0	1.0
17.00	0.8	99.0	1.0

项目	线性回归方程	R²	检出限/（mg·kg^-1）	定量限/（mg·kg^-1）
L-抗坏血酸（还原前）	y=1.804 915×10⁵x-2.380 433×10³	0.999 9	0.14	0.42
D-异抗坏血酸（还原前）	y=1.790 571×10⁵x-1.972 464×10³	0.999 9	0.13	0.39
L-抗坏血酸（还原后）	y=1.804 915×10⁵x-2.380 433×10³	0.999 9	0.35	1.0
D-异抗坏血酸（还原后）	y=1.790 571×10⁵x-1.972 464×10³	0.999 9	0.32	1.0

项目	线性回归方程	R²	检出限/（mg·kg^-1）	定量限/（mg·kg^-1）
L-抗坏血酸（还原前）	y=1.804 915×10⁵x-2.380 433×10³	0.999 9	0.14	0.42
D-异抗坏血酸（还原前）	y=1.790 571×10⁵x-1.972 464×10³	0.999 9	0.13	0.39
L-抗坏血酸（还原后）	y=1.804 915×10⁵x-2.380 433×10³	0.999 9	0.35	1.0
D-异抗坏血酸（还原后）	y=1.790 571×10⁵x-1.972 464×10³	0.999 9	0.32	1.0

项目	添加水平
	1.0 mg·kg^-1		3.0 mg·kg^-1		30.0 mg·kg^-1
	平均回收率	RSD	平均回收率	RSD	平均回收率	RSD
L-抗坏血酸	106.0	1.90	90.3	2.40	90.0	0.55
D-异抗坏血酸	103.0	2.50	92.3	0.98	91.3	0.58