灵芝菌种液氮保藏工艺分析

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20210419

摘要/Abstract

摘要：

为优化灵芝菌种的液氮保藏工艺,从降温程序、培养基、菌饼大小、甘油浓度和解冻方式等方面对菌种保藏影响进行分析。结果表明,灵芝菌种的降温程序为从常温降至4 ℃时,以每分钟4 ℃或9 ℃速率降温,后以每分钟1 ℃降温至-40 ℃。保藏菌种采用添加木屑浸出液的PDA作为培养基,取菌饼8 mm大小,以10%~15%甘油作为保护剂,保藏后在35 ℃水浴快速解冻后的菌种活力较好。本研究可为灵芝菌种进行液氮保藏提供技术依据。

关键词: 灵芝, 菌种保藏, 菌种活力, 生长速度

中图分类号:

S567.3

谢航, 林娟. 灵芝菌种液氮保藏工艺分析[J]. 浙江农业科学, 2021, 62(4): 705-708.

图/表 6

参考文献 23

[1]	吴兴亮. 中国灵芝图鉴[M]. 北京: 科学出版社, 2004.
[2]	崔宝凯, 吴声华. 普遍栽培灵芝种类的拉丁学名[J]. 菌物学报, 2020,39(1):7-12.
[3]	才晓玲, 何伟, 安福全. 灵芝种质资源研究进展[J]. 现代农业科技, 2016(6):99-100.
[4]	陈永敢, 李珍, 羊燕萍, 等. 海南产Ganoderma lingzhi种质的鉴定[J]. 种子, 2018,37(4):59-61.
[5]	KWON O C, LEE C S, PARK Y J. SNP and SCAR markers for specific discrimination of antler-shaped Ganoderma lucidum[J]. Microorganisms, 2019,7(1):12.
[6]	CHEN L H, ABULIZI A, LI M. Protective effect of Ganoderma (Lingzhi) on radiation and chemotherapy[M] //Advances in Experimental Medicine and Biology. Singapore: Springer Singapore, 2019: 119-142.
[7]	刘洋, 覃媚媚, 罗印斌, 等. 灵芝孢子主要活性成分及其功能研究进展[J]. 北方园艺, 2020(5):138-146.
[8]	LU J H, HE R J, SUN P L, et al. Molecular mechanisms of bioactive polysaccharides from Ganoderma lucidum (Lingzhi), a review[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2020,150:765-774. URL PMID
[9]	蒋婷婷, 王勇. 灵芝三萜类成分的研究进展[J]. 海峡药学, 2012,24(1):1-4.
[10]	ZHAO Z Z, LIANG X B, FENG W S, et al. Unusual constituents from the medicinal mushroom Ganoderma Lingzhi[J]. RSC Advances, 2019,9(63):36931-36939.
[11]	腾海艳. 两种灵芝孢子粉多糖的分离纯化和结构[J]. 菌物学报, 2020,39(1):120-127.
[12]	LIU D B, GONG J, DAI W K, et al. The genome of Ganoderma lucidum provides insights into triterpenes biosynjournal and wood degradation [corrected[J]. PLoS One, 2012,7(5):e36146. URL PMID
[13]	YU G J, WANG M, HUANG J, et al. Deep insight into the Ganoderma lucidum by comprehensive analysis of its transcriptome[J]. PLoS One, 2012,7(8):e44031. URL PMID
[14]	WU F L, SHI L, YAO J, et al. The cloning, characterization, and functional analysis of a gene encoding an isopentenyl diphosphate isomerase involved in triterpene biosynjournal in the Lingzhi or reishi medicinal mushroom Ganoderma lucidum (higher Basidiomycetes)[J]. International Journal of Medicinal Mushrooms, 2013,15(3):223-232. DOI URL PMID
[15]	朱静, 宋书琪, 岳思宁, 等. 灵芝转录因子AreA的生物学功能[J]. 菌物学报, 2020,39(1):57-65.
[16]	顾金刚, 李世贵, 姜瑞波. 真菌保藏技术研究进展[J]. 菌物学报, 2007,26(2):316-320.
[17]	曾辉, 王泽生. 食用菌菌种保藏研究进展[J]. 中国食用菌, 1994,13(5):5-6.
[18]	陈燕妍. 超低温冻结保藏担子菌[J]. 真菌学报, 1987,6(2):110-117.
[19]	刘新锐, 叶夏, 王玉青, 等. 香菇菌种液氮保藏技术研究[J]. 热带作物学报, 2011,32(7):1360-1363.
[20]	柳焕章, 卢月霞, 郑素月. 四种食药用真菌菌种扩繁培养基筛选[J]. 北方园艺, 2014(17):145-147.
[21]	代彦满, 陈书明, 张棋. 赤灵芝菌种培养基的比较与筛选[J]. 西北林学院学报, 2019,34(4):162-165.
[22]	张引芳, 张婤. 不同冷冻保护剂对食用菌孢子及菌丝体保藏的影响[J]. 食用菌, 1990,12(6):10.
[23]	王云, 周林, 张昕艳, 等. 灵芝的营养药用价值和生物学特性[J]. 山西农业科学, 1989,17(7):27-28.

程序编号	降温处理
1	样品经1 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
2	样品经1 ℃·min^-1降至4 ℃,再以4 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
3	样品经1 ℃·min^-1降至4 ℃,再以9 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
4	样品经4 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
5	样品经4 ℃·min^-1降至4 ℃,再以1 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
6	样品经4 ℃·min^-1降至4 ℃,再以9 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
7	样品经9 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
8	样品经9 ℃·min^-1降至4 ℃,再以1 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
9	样品经9 ℃·min^-1降至4 ℃,再以4 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
10	样品不经预冷处理直接放入液氮

程序编号	降温处理
1	样品经1 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
2	样品经1 ℃·min^-1降至4 ℃,再以4 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
3	样品经1 ℃·min^-1降至4 ℃,再以9 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
4	样品经4 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
5	样品经4 ℃·min^-1降至4 ℃,再以1 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
6	样品经4 ℃·min^-1降至4 ℃,再以9 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
7	样品经9 ℃·min^-1降至-40 ℃,直接放入液氮
8	样品经9 ℃·min^-1降至4 ℃,再以1 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
9	样品经9 ℃·min^-1降至4 ℃,再以4 ℃·min^-1降到-40 ℃,直接放入液氮
10	样品不经预冷处理直接放入液氮

程序编号	萌发时间/ d	萌发率/ %	平均生长速度/ (cm·d^-1)
1	2	100	0.73±0.01 b B
2	5	100	0.54±0.02 g FG
3	3	100	0.66±0.02 c C
4	4	100	0.62±0.02 d D
5	2	100	0.78±0.01 a A
6	5	100	0.51±0.02 h G
7	5	100	0.56±0.02 fg EF
8	2	100	0.76±0.02 a A
9	6	80	0.59±0.02 e DE
10	6	60	0.57±0.02 ef E

程序编号	萌发时间/ d	萌发率/ %	平均生长速度/ (cm·d^-1)
1	2	100	0.73±0.01 b B
2	5	100	0.54±0.02 g FG
3	3	100	0.66±0.02 c C
4	4	100	0.62±0.02 d D
5	2	100	0.78±0.01 a A
6	5	100	0.51±0.02 h G
7	5	100	0.56±0.02 fg EF
8	2	100	0.76±0.02 a A
9	6	80	0.59±0.02 e DE
10	6	60	0.57±0.02 ef E

培养基质	萌发时间/ d	萌发率/ %	平均生长速度/ (cm·d^-1)
PDA	2	100	0.74±0.10 c B
培养基2	2	100	0.76±0.04 c B
培养基3	2	100	0.83±0.04 b A
培养基4	2	100	0.87±0.03 a A

灵芝菌种液氮保藏工艺分析

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表 6

参考文献 23

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

甘油浓度/ %	萌发时间/ d	萌发率/ %	平均生长速度/ (cm·d^-1)
0	4	60	0.44±0.02 b B
5	2	100	0.79±0.02 a A
10	2	100	0.81±0.03 a A
15	1	100	0.82±0.02 a A
20	3	100	0.81±0.03 a A

解冻温度/ ℃	平均萌发时间/d	萌发率/ %	平均生长速度/ (cm·d^-1)
25	2	100	0.61±0.05 c C
30	2	100	0.70±0.01 b B
35	2	100	0.77±0.02 a A
40	3	100	0.55±0.05 c C

[1]	徐靖, 赵建霞, 张国亮, 王瑛, 郑化先, 李明焱, 李振皓. 基于网络药理学的灵芝作用机制研究[J]. 浙江农业科学, 2022, 63(8): 1837-1846.
[2]	周威杰, 罗培娟, 成纪予. 利用竹屑代料栽培灵芝的试验[J]. 浙江农业科学, 2022, 63(7): 1469-1471.
[3]	朱卫东, 潘德宇, 赵雁, 陈泽林, 臧宏军, 黄庆. 不同处理对灵芝连作障碍的影响[J]. 浙江农业科学, 2021, 62(4): 701-704.
[4]	饶毅萍, 张淑怡, 叶湘瑜, 余海侨. 食用菌菌糠对废水中重金属Cr(Ⅲ)的吸附性能[J]. 浙江农业科学, 2021, 62(12): 2509-2512.
[5]	徐金晶, 李金辉, 钭凌娟, 方莉. 灵芝栽培品种引选与培养基配方筛选[J]. 浙江农业科学, 2021, 62(11): 2169-2170.
[6]	何金宇, 刘玉洋, 徐靖, 王晓彤, 陈晓俊, 王慧中, 卢江杰. 灵芝全基因组SSR标记开发及其种质资源遗传多样性评估[J]. 浙江农业科学, 2020, 61(5): 967-973.
[7]	薛晨晨, 叶松青, 张炯, 袁星星, 陈新, 王学军, 吴春芳. 不同春化时间对蚕豆生长和开花的影响[J]. 浙江农业科学, 2018, 59(9): 1683-1686.
[8]	俞巍毅. 浙北地区灵芝优良品种的引种和选育[J]. 浙江农业科学, 2016, 1(4): 486-.
[9]	朱惠照1，郑化先1，王瑛2，李建淼2，徐靖3，朱卫东1，李明焱1,2,3*. 灵芝品种仙芝1号的选育[J]. 浙江农业科学, 2014, 1(8): 1163-.
[10]	高佳佳;刘书来;丁玉庭. 红茶添加对灵芝菌液态发酵产胞外多糖的影响 [J]. , 2014, 1(1): 0-85.
[11]	吴吉安;曾念开;CHOONG Yew keong;陈向东. 珍稀食药用真菌虎乳灵芝的研究概况[J]. , 2013, 1(6): 0-664.
[12]	周祖法;王伟科;袁卫东;闫静 . 大杯蕈对碳、氮源的利用及其组合研究[J]. , 2006, 1(04): 0-387.
[13]	陈学智;陈永坤;李修勤;周灿媛;吴跃华;王明利 . 7个杂交苏丹草品种的特性分析[J]. , 2006, 1(02): 0-207.
[14]	赵爱珍;周力;王德前;沈军达;陶争荣;华楚衍;卢立志;徐坚;毛长国. 巴巴里番鸭与本地番鸭性能比较[J]. , 2005, 1(02): 0-150.
[15]	张海娟;曹隆枢;叶少青 . 段木灵芝优质高产栽培技术[J]. , 2004, 1(03): 0-138.