
浙江农业科学 ›› 2026, Vol. 67 ›› Issue (2): 361-368.DOI: 10.16178/j.issn.0528-9017.20240735
李雪君1(
), 李建华2, 郭敬1, 王亚乐1, 孙计平1, 孙焕1, 平文丽1, 李丽华3(
)
收稿日期:2024-09-23
出版日期:2026-02-28
发布日期:2026-03-07
通讯作者:
李丽华,E-mail:lilihua11yan@163.com。
作者简介:李雪君,主要从事烟草遗传育种工作。E-mail:lixuejun8373@163.com。
基金资助:
LI Xuejun1(
), LI Jianhua2, GUO Jing1, WANG Yale1, SUN Jiping1, SUN Huan1, PING Wenli1, LI Lihua3(
)
Received:2024-09-23
Online:2026-02-28
Published:2026-03-07
摘要:
为定向提高烤烟品种渠首1号对烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的抗性,以渠首1号为改良材料,以TMV免疫品种Va770为供体亲本,通过杂交、回交,利用分子标记结合表型筛选得到TMV免疫的纯合株系TMV-3。大田鉴定结果表明TMV-3农艺性状与渠首1号基本保持一致;接种鉴定结果表明TMV-3对TMV的抗性表现为免疫,TMV接种后的活性氧积累量少于渠首1号,叶片中的TMV正调控基因NtRAR1、NtNTF4、NtPR1 a、NtHAK1、NtSGT1的相对表达量均高于渠首1号,负调控基因TMV-CP相对表达量低于渠首1号,黑胫病抗性有所下降。本研究表明,渠首1号定向改良品系TMV-3对TMV免疫,其他性状与渠首1号基本保持一致,为渠首1号病毒病抗性的定向改良提供了材料基础。
中图分类号:
李雪君, 李建华, 郭敬, 王亚乐, 孙计平, 孙焕, 平文丽, 李丽华. 烤烟品种渠首1号TMV抗性改良株系TMV-3的创制[J]. 浙江农业科学, 2026, 67(2): 361-368.
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| 基因 | 正向引物(5′→3′) | 反向引物(5′→3′) |
|---|---|---|
| TMV-N367 | ACTTTTGGCGTACTTCCTTT | ACTTTTGGCGTACTTCCTTT |
| TM508-007 | CACCATGGTTTGGCTTTCAT | GCAAAATGCAAAAAGGCAAT |
表1 分子标记引物序列
Table 1 Primer sequences of molecular markers
| 基因 | 正向引物(5′→3′) | 反向引物(5′→3′) |
|---|---|---|
| TMV-N367 | ACTTTTGGCGTACTTCCTTT | ACTTTTGGCGTACTTCCTTT |
| TM508-007 | CACCATGGTTTGGCTTTCAT | GCAAAATGCAAAAAGGCAAT |
| 基因 | 正向引物(5′→3′) | 反向引物(5′→3′) |
|---|---|---|
| NtRAR1(正调控基因) | AAACAAGGGCTGTGGTAAGA | CTCATCCGGTCATGGAAGATAG |
| NtNTF4(正调控基因) | TCACAACGGTGAAATCCAAG | TCGGGTTAGATCCGAAAGAG |
| NtPR1 a(正调控基因) | ACAGCTCGTGCAGATGTAGGT | GCTAGGTTTTCGCCGTATTG |
| NtHAK1(正调控基因) | ATCCACACCGAGCTTGTTTCAGGA | TGGGTCCAATTCTTCCCACCAAGA |
| NtSGT1(正调控基因) | GGTGGATCAGTGAGATGTATGG | CAACACCCTCTCGTGGAATATAG |
| TMV-CP(负调控基因) | GTTAGGTTCCCTGACAGTGACTTT | GTTCGCCTGATTTTCAACTTCT |
| L25(内参基因) | CCCCTCACCACAGAGTCTGC | AAGGGTGTTGTTGTCCTCAATCTT |
表2 实时荧光定量PCR引物序列
Table 2 Primer sequences of real-time fluorescent quantitative PCR
| 基因 | 正向引物(5′→3′) | 反向引物(5′→3′) |
|---|---|---|
| NtRAR1(正调控基因) | AAACAAGGGCTGTGGTAAGA | CTCATCCGGTCATGGAAGATAG |
| NtNTF4(正调控基因) | TCACAACGGTGAAATCCAAG | TCGGGTTAGATCCGAAAGAG |
| NtPR1 a(正调控基因) | ACAGCTCGTGCAGATGTAGGT | GCTAGGTTTTCGCCGTATTG |
| NtHAK1(正调控基因) | ATCCACACCGAGCTTGTTTCAGGA | TGGGTCCAATTCTTCCCACCAAGA |
| NtSGT1(正调控基因) | GGTGGATCAGTGAGATGTATGG | CAACACCCTCTCGTGGAATATAG |
| TMV-CP(负调控基因) | GTTAGGTTCCCTGACAGTGACTTT | GTTCGCCTGATTTTCAACTTCT |
| L25(内参基因) | CCCCTCACCACAGAGTCTGC | AAGGGTGTTGTTGTCCTCAATCTT |
| 品种(系) | 株高/cm | 有效叶数 | 茎围/cm | 节距/cm | 最大叶长/cm | 最大叶宽/cm |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 渠首1号 | 133.7±1.23 a | 20.1±2.05 a | 10.8±0.65 a | 6.0±0.03 a | 72.0±2.62 a | 32.8±3.26 a |
| TMV-3 | 134.1±1.03 a | 20.3±1.25 a | 11.0±0.25 a | 6.0±0.02 a | 72.1±2.42 a | 33.1±3.16 a |
表3 TMV-3与渠首1号的主要农艺性状
Table 3 Agronomic trait of TMV-3 and Qushou 1
| 品种(系) | 株高/cm | 有效叶数 | 茎围/cm | 节距/cm | 最大叶长/cm | 最大叶宽/cm |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 渠首1号 | 133.7±1.23 a | 20.1±2.05 a | 10.8±0.65 a | 6.0±0.03 a | 72.0±2.62 a | 32.8±3.26 a |
| TMV-3 | 134.1±1.03 a | 20.3±1.25 a | 11.0±0.25 a | 6.0±0.02 a | 72.1±2.42 a | 33.1±3.16 a |
| 地点 | 品种(系) | 播种期 | 移栽期 | 现蕾期 | 平顶期 | 下部叶采收期 | 采收结束日期 | 大田生育期/d | 成熟期/d |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 南阳 | TMV-3 | 2月24日 | 4月28日 | 6月17日 | 7月2日 | 8月12日 | 9月5日 | 130 | 106 |
| 渠首1号 | 2月24日 | 4月28日 | 6月20日 | 7月3日 | 8月12日 | 9月5日 | 130 | 106 | |
| 洛阳 | TMV-3 | 2月24日 | 5月2日 | 7月2日 | 7月12日 | 8月12日 | 9月12日 | 133 | 102 |
| 渠首1号 | 2月24日 | 5月2日 | 7月2日 | 7月13日 | 8月12日 | 9月12日 | 133 | 102 |
表4 TMV-3和渠首1号大田生育期
Table 4 Growth period of TMV-3 and Qushou 1
| 地点 | 品种(系) | 播种期 | 移栽期 | 现蕾期 | 平顶期 | 下部叶采收期 | 采收结束日期 | 大田生育期/d | 成熟期/d |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 南阳 | TMV-3 | 2月24日 | 4月28日 | 6月17日 | 7月2日 | 8月12日 | 9月5日 | 130 | 106 |
| 渠首1号 | 2月24日 | 4月28日 | 6月20日 | 7月3日 | 8月12日 | 9月5日 | 130 | 106 | |
| 洛阳 | TMV-3 | 2月24日 | 5月2日 | 7月2日 | 7月12日 | 8月12日 | 9月12日 | 133 | 102 |
| 渠首1号 | 2月24日 | 5月2日 | 7月2日 | 7月13日 | 8月12日 | 9月12日 | 133 | 102 |
| 品种(系) | 接种TMV 7 d | 接种TMV 14 d | 接种TMV 21 d | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | |
| TMV-3 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 渠首1号 | 0 | 0 | I | 100 | 45 | MS | 100 | 56.67 | MS |
| Va770 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
表5 苗期TMV接种鉴定结果
Table 5 Identification results of TMV inoculation at seedling stage
| 品种(系) | 接种TMV 7 d | 接种TMV 14 d | 接种TMV 21 d | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | |
| TMV-3 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 渠首1号 | 0 | 0 | I | 100 | 45 | MS | 100 | 56.67 | MS |
| Va770 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 品种(系) | 接种TMV 7 d | 接种TMV 14 d | 接种TMV 21 d | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | |
| TMV-3 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 渠首1号 | 0 | 0 | I | 100 | 28.32 | MR | 100 | 46.44 | MS |
| Va770 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
表6 大田旺长期TMV接种鉴定结果
Table 6 Identification results of TMV inoculation at vigorous growing period in field
| 品种(系) | 接种TMV 7 d | 接种TMV 14 d | 接种TMV 21 d | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 | |
| TMV-3 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 渠首1号 | 0 | 0 | I | 100 | 28.32 | MR | 100 | 46.44 | MS |
| Va770 | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I | 0 | 0 | I |
| 品种(系) | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 |
|---|---|---|---|
| TMV-3 | 24.1 | 16.48 | R |
| 渠首1号 | 3.4 | 2.68 | R |
| Va770 | 33.3 | 24.44 | MR |
表7 田间黑胫病接种鉴定
Table 7 Identification of black shank inoculation in field
| 品种(系) | 发病率/% | 病情指数 | 抗性评价 |
|---|---|---|---|
| TMV-3 | 24.1 | 16.48 | R |
| 渠首1号 | 3.4 | 2.68 | R |
| Va770 | 33.3 | 24.44 | MR |
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