浙江农业科学 ›› 2018, Vol. 59 ›› Issue (6): 1028-1032.DOI: 10.16178/j.issn.0528-9017.20180651

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免疫胶体金技术检测猪繁殖与呼吸综合征

徐丽华, 李军星, 苏菲, 田瑞雨, 王赛, 袁秀芳*   

  1. 浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州 310021
  • 收稿日期:2018-04-19 出版日期:2018-06-11
  • 通讯作者: 袁秀芳,E-mail:xiufangyuan@126.com
  • 作者简介:徐丽华(1979—),浙江桐乡人,助理研究员,硕士,从事猪病诊断技术研究工作,E-mail:1183669287@qq.com。
  • 基金资助:
    杭州市农业科研主动设计项目(20162012A07)

  • Received:2018-04-19 Online:2018-06-11

摘要: 采用斑点胶体金技术建立一种快速、简便、准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法。运用RT-PCR技术克隆出PRRSV核衣壳蛋白基因,经原核表达与蛋白纯化获得重组的核衣壳蛋白,作为诊断抗原。采用柠檬酸三钠还原法制备了直径为18~20 nm的胶体金,对兔抗猪IgG抗体进行标记后,进一步组装成斑点胶体金免疫检测试剂。经猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阴性和阳性血清检测,斑点胶体金免疫检测试剂仅与阳性血清发生反应,特异性强,反应30~40 min内就可以在硝酸纤维膜上出现清晰的红色斑点,其灵敏度和Dot-ELISA法相仿。该检测方法可广泛应用于PRRS的临床诊断和流行病学调查,也可作为研究兽医快速诊断的技术基础。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征, 斑点胶体金, 检测

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