固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定小麦中双唑草酮和环吡氟草酮残留

doi:10.16178/j.issn.0528-9017.20231113

摘要/Abstract

摘要：

建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定小麦中双唑草酮和环吡氟草酮残留的方法。小麦样品中双唑草酮和环吡氟草酮采用酸化乙腈提取,氯化钠和无水硫酸镁盐析,HLB固相萃取柱净化,以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱,ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离,在电喷雾离子源正模式下,采用多反应监测(MRM)模式测定,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,双唑草酮和环吡氟草酮在2~100 μg·L^-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;检出限为2 μg·kg^-1,定量限为6 μg·kg^-1。在6、20、50 μg·kg^-1添加水平下,双唑草酮的平均回收率为93.9%~99.6%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~4.8%,环吡氟草酮的平均回收率为83.6%~90.7%,相对标准偏差为1.4%~4.5% (n=6)。该方法灵敏、准确,适用于小麦中双唑草酮和环吡氟草酮残留的测定。

关键词: 固相萃取, 高效液相色谱-串联质谱, 双唑草酮, 环吡氟草酮, 小麦

Abstract:

A method was established for the simultaneous determination of bipyrazone and cypyrafluone in wheat by solid-phase extraction and high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Bipyrazone and cypyrafluone in wheat samples were extracted by acidified acetonitrile, salted out by sodium chloride and anhydrous magnesium sulfate, cleaned up by HLB solid phase extraction column, separated by ACQUITY UPLC BEH C18 column with gradient elution of water (containing 0.1% formic acid) and acetonitrile (containing 0.1% formic acid) as the mobile phase, detected by positive electrospray ionization using multiple reaction monitoring (MRM) mode and finally quantified by external standard method of matrix calibration curve. Good linear relationship displays in the concentration range of 2-100 μg·L^-1 for bipyrazone and cypyrafluone with correlation coefficient (r) greater than 0.998. The limits of detection of them are 2 μg·kg^-1, and the limits of quantitation are 6 μg·kg^-1. At three spiked concentration levels of 6, 20 and 50 μg·kg^-1, the average recoveries of bipyrazone are 93.9%-99.6%, with relative standard deviations (RSDs) of 2.2%-4.8%, and the average recoveries of cypyrafluone are 83.6%-90.7%, with RSDs of 1.4%-4.5% (n=6). The method is sensitive, accurate and suitable for determination of bipyrazone and cypyrafluone in wheat.

Key words: solid-phase extraction, high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, bipyrazone, cypyrafluone, wheat

中图分类号:

S512.1

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图/表 6

表1 梯度洗脱程序

Table 1 Gradient elution program

时间/min	流动相A/%	流动相B/%
0	95	5
0.5	95	5
3.5	35	65
5.0	5	95
5.1	95	5
7.0	95	5

表2 双唑草酮和环吡氟草酮的质谱参数

Table 2 Mass spectrometry parameters of bipyrazone and cypyrafluone

除草剂	母离子 (m/z)	子离子 (m/z)	去簇电压/ V	碰撞能量/ eV
双唑草酮	485.1	123.2^*	85	48
		82.2	85	84
环吡氟草酮	442.0	406.1^*	150	31
		242.2	150	40

图1 3种提取溶剂的提取效率(n=3)

Fig.1 Extraction efficiency of 3 extractants (n=3)

表3 双唑草酮和环吡氟草酮的线性范围、相关系数和基质效应

Table 3 Linear ranges, correlation coefficients and matrix effects of bipyrazone and cypyrafluone

除草剂	线性范围/(μg·L^-1)	线性回归方程	相关系数r	基质效应ME
双唑草酮	2~100	y=112 346x+33 237(甲醇)	0.999 09	—
		y=71 184.8x+11 022.312 95(基质)	0.998 58	0.63
环吡氟草酮	2~100	y=63 220.5x+14 901.071 10(甲醇)	0.999 82	—
		y=56 288.2x-1 420.676 50(基质)	0.998 88	0.89

图2 样品多反应监测(MRM)色谱图 A1、A2表示空白样品;B1表示添加6 μg·kg-1双唑草酮;B2表示添加6 μg·kg-1环吡氟草酮。

Fig.2 MRM chromatograms of samples

表4 双唑草酮和环吡氟草酮的回收率和相对标准偏差(n=6)

Table 4 Recovery rates and RSDs of bipyrazone and cypyrafluone (n=6)

除草剂	添加水平/ (μg·kg^-1)	平均回收率/ %	RSD/%
双唑草酮	6	99.6	4.8
	20	93.9	2.2
	50	96.8	3.0
环吡氟草酮	6	85.3	4.5
	20	83.6	1.4
	50	90.7	1.9

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